無錫同創生物科技有限公司

2,6-

二氯酚靛酚鈉法測定維生素

C

含量

一、實驗目的

維生素

C

是生物體內抗氧化體系成員之一。因此，維生素

C

含量可作為植物抗衰老和抗逆

境的重要生理指標，

也可作為果品質量、

選育良種的鑒別指標。

通過本實驗掌握用

2,6-

二氯

酚靛酚鈉法測定植物組織維生素

C

含量的方法。

二、實驗原理

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉是氧化性染料，可將還原態的維生素

C

氧化成脫氫維生素

C

，而染料本

身從深藍色被還原成無色的衍生物。

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉在酸性條件下呈紅色。

在滴定終點之前，

滴下的

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉立即

被還原成無色。當溶液從無色轉變成微紅色時，即為滴定終點。

三、實驗材料

新鮮生菜

四、設備與試劑

滴定管、三角瓶、研缽、量筒、移液管

1

％草酸，

0.1%2

，

6-

二氯酚靛酚鈉溶液

五、實驗步驟

（一）維生素

C

的提取

稱取

1.0 g

新鮮樣品（已稱好）

，置研缽中，分次加

20ml 1

％草酸，研成勻漿（用

1%

的草酸

定容

20ml

）

。通過紗布過濾后取

10ml

放于離心機中

3000r/min

離心

10min,

吸取上清使用。

（二）維生素

C

的測定

吸取濾液

10 ml

，放入

50 ml

三角瓶中，立即用

0.1% 2

，

6-

二氯酚靛酚鈉溶液滴定至出現明

顯的粉紅色在

15 s

內不消失為止。

記錄所用滴定液體積

（另取

10ml 1%

草酸作空白對照

）

。

（三）標準液的標定

取

1mg/ml

抗壞血酸溶液

1ml

置于錐形瓶中，加

9ml 1%

草酸，用

0.1%2

，

6-

二氯酚靛酚滴定

至淡紅色

15s

不消失。

計算出

1ml

染料相當于多少毫克抗壞血酸

（取

10ml 1%

草酸作空白對

照）

。

1.2ml 

染料相當于

1mg

抗壞血酸

（四）含量計算

維生素

C

（

mg/g

樣品）

=

（樣品消耗染料體積

-

空白消耗染料體積）╳提取定容后的體積╳

1ml

染料能氧化抗壞血酸的毫克數

/

滴定用的樣品體積╳水果質量

六、注意事項

1. 

操作要盡可能快，并防止與鐵、銅器具接觸，以減少維生素

C

的氧化。

2. 

草酸及樣品的提取液避免日光直射

2,6-

二氯酚靛酚鈉法測定維生素

C

含量

一、實驗目的

維生素

C

是生物體內抗氧化體系成員之一。因此，維生素

C

含量可作為植物抗衰老和抗逆

境的重要生理指標，

也可作為果品質量、

選育良種的鑒別指標。

通過本實驗掌握用

2,6-

二氯

酚靛酚鈉法測定植物組織維生素

C

含量的方法。

二、實驗原理

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉是氧化性染料，可將還原態的維生素

C

氧化成脫氫維生素

C

，而染料本

身從深藍色被還原成無色的衍生物。

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉在酸性條件下呈紅色。

在滴定終點之前，

滴下的

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉立即

被還原成無色。當溶液從無色轉變成微紅色時，即為滴定終點。

三、實驗材料

新鮮生菜

四、設備與試劑

滴定管、三角瓶、研缽、量筒、移液管

1

％草酸，

0.1%2

，

6-

二氯酚靛酚鈉溶液

五、實驗步驟

（一）維生素

C

的提取

稱取

1.0 g

新鮮樣品（已稱好）

，置研缽中，分次加

20ml 1

％草酸，研成勻漿（用

1%

的草酸

定容

20ml

）

。通過紗布過濾后取

10ml

放于離心機中

3000r/min

離心

10min,

吸取上清使用。

（二）維生素

C

的測定

吸取濾液

10 ml

，放入

50 ml

三角瓶中，立即用

0.1% 2

，

6-

二氯酚靛酚鈉溶液滴定至出現明

顯的粉紅色在

15 s

內不消失為止。

記錄所用滴定液體積

（另取

10ml 1%

草酸作空白對照

）

。

（三）標準液的標定

取

1mg/ml

抗壞血酸溶液

1ml

置于錐形瓶中，加

9ml 1%

草酸，用

0.1%2

，

6-

二氯酚靛酚滴定

至淡紅色

15s

不消失。

計算出

1ml

染料相當于多少毫克抗壞血酸

（取

10ml 1%

草酸作空白對

照）

。

1.2ml 

染料相當于

1mg

抗壞血酸

（四）含量計算

維生素

C

（

mg/g

樣品）

=

（樣品消耗染料體積

-

空白消耗染料體積）╳提取定容后的體積╳

1ml

染料能氧化抗壞血酸的毫克數

/

滴定用的樣品體積╳水果質量

六、注意事項

1. 

操作要盡可能快，并防止與鐵、銅器具接觸，以減少維生素

C

的氧化。

2. 

草酸及樣品的提取液避免日光直射

2,6-

二氯酚靛酚鈉法測定維生素

C

含量

一、實驗目的

維生素

C

是生物體內抗氧化體系成員之一。因此，維生素

C

含量可作為植物抗衰老和抗逆

境的重要生理指標，

也可作為果品質量、

選育良種的鑒別指標。

通過本實驗掌握用

2,6-

二氯

酚靛酚鈉法測定植物組織維生素

C

含量的方法。

二、實驗原理

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉是氧化性染料，可將還原態的維生素

C

氧化成脫氫維生素

C

，而染料本

身從深藍色被還原成無色的衍生物。

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉在酸性條件下呈紅色。

在滴定終點之前，

滴下的

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉立即

被還原成無色。當溶液從無色轉變成微紅色時，即為滴定終點。

三、實驗材料

新鮮生菜

四、設備與試劑

滴定管、三角瓶、研缽、量筒、移液管

1

％草酸，

0.1%2

，

6-

二氯酚靛酚鈉溶液

五、實驗步驟

（一）維生素

C

的提取

稱取

1.0 g

新鮮樣品（已稱好）

，置研缽中，分次加

20ml 1

％草酸，研成勻漿（用

1%

的草酸

定容

20ml

）

。通過紗布過濾后取

10ml

放于離心機中

3000r/min

離心

10min,

吸取上清使用。

（二）維生素

C

的測定

吸取濾液

10 ml

，放入

50 ml

三角瓶中，立即用

0.1% 2

，

6-

二氯酚靛酚鈉溶液滴定至出現明

顯的粉紅色在

15 s

內不消失為止。

記錄所用滴定液體積

（另取

10ml 1%

草酸作空白對照

）

。

（三）標準液的標定

取

1mg/ml

抗壞血酸溶液

1ml

置于錐形瓶中，加

9ml 1%

草酸，用

0.1%2

，

6-

二氯酚靛酚滴定

至淡紅色

15s

不消失。

計算出

1ml

染料相當于多少毫克抗壞血酸

（取

10ml 1%

草酸作空白對

照）

。

1.2ml 

染料相當于

1mg

抗壞血酸

（四）含量計算

維生素

C

（

mg/g

樣品）

=

（樣品消耗染料體積

-

空白消耗染料體積）╳提取定容后的體積╳

1ml

染料能氧化抗壞血酸的毫克數

/

滴定用的樣品體積╳水果質量

六、注意事項

1. 

操作要盡可能快，并防止與鐵、銅器具接觸，以減少維生素

C

的氧化。

2. 

草酸及樣品的提取液避免日光直射

2,6-

二氯酚靛酚鈉法測定維生素

C

含量

一、實驗目的

維生素

C

是生物體內抗氧化體系成員之一。因此，維生素

C

含量可作為植物抗衰老和抗逆

境的重要生理指標，

也可作為果品質量、

選育良種的鑒別指標。

通過本實驗掌握用

2,6-

二氯

酚靛酚鈉法測定植物組織維生素

C

含量的方法。

二、實驗原理

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉是氧化性染料，可將還原態的維生素

C

氧化成脫氫維生素

C

，而染料本

身從深藍色被還原成無色的衍生物。

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉在酸性條件下呈紅色。

在滴定終點之前，

滴下的

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉立即

被還原成無色。當溶液從無色轉變成微紅色時，即為滴定終點。

三、實驗材料

新鮮生菜

四、設備與試劑

滴定管、三角瓶、研缽、量筒、移液管

1

％草酸，

0.1%2

，

6-

二氯酚靛酚鈉溶液

五、實驗步驟

（一）維生素

C

的提取

稱取

1.0 g

新鮮樣品（已稱好）

，置研缽中，分次加

20ml 1

％草酸，研成勻漿（用

1%

的草酸

定容

20ml

）

。通過紗布過濾后取

10ml

放于離心機中

3000r/min

離心

10min,

吸取上清使用。

（二）維生素

C

的測定

吸取濾液

10 ml

，放入

50 ml

三角瓶中，立即用

0.1% 2

，

6-

二氯酚靛酚鈉溶液滴定至出現明

顯的粉紅色在

15 s

內不消失為止。

記錄所用滴定液體積

（另取

10ml 1%

草酸作空白對照

）

。

（三）標準液的標定

取

1mg/ml

抗壞血酸溶液

1ml

置于錐形瓶中，加

9ml 1%

草酸，用

0.1%2

，

6-

二氯酚靛酚滴定

至淡紅色

15s

不消失。

計算出

1ml

染料相當于多少毫克抗壞血酸

（取

10ml 1%

草酸作空白對

照）

。

1.2ml 

染料相當于

1mg

抗壞血酸

（四）含量計算

維生素

C

（

mg/g

樣品）

=

（樣品消耗染料體積

-

空白消耗染料體積）╳提取定容后的體積╳

1ml

染料能氧化抗壞血酸的毫克數

/

滴定用的樣品體積╳水果質量

六、注意事項

1. 

操作要盡可能快，并防止與鐵、銅器具接觸，以減少維生素

C

的氧化。

2. 

草酸及樣品的提取液避免日光直射

2,6-

二氯酚靛酚鈉法測定維生素

C

含量

一、實驗目的

維生素

C

是生物體內抗氧化體系成員之一。因此，維生素

C

含量可作為植物抗衰老和抗逆

境的重要生理指標，

也可作為果品質量、

選育良種的鑒別指標。

通過本實驗掌握用

2,6-

二氯

酚靛酚鈉法測定植物組織維生素

C

含量的方法。

二、實驗原理

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉是氧化性染料，可將還原態的維生素

C

氧化成脫氫維生素

C

，而染料本

身從深藍色被還原成無色的衍生物。

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉在酸性條件下呈紅色。

在滴定終點之前，

滴下的

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉立即

被還原成無色。當溶液從無色轉變成微紅色時，即為滴定終點。

三、實驗材料

新鮮生菜

四、設備與試劑

滴定管、三角瓶、研缽、量筒、移液管

1

％草酸，

0.1%2

，

6-

二氯酚靛酚鈉溶液

五、實驗步驟

（一）維生素

C

的提取

稱取

1.0 g

新鮮樣品（已稱好）

，置研缽中，分次加

20ml 1

％草酸，研成勻漿（用

1%

的草酸

定容

20ml

）

。通過紗布過濾后取

10ml

放于離心機中

3000r/min

離心

10min,

吸取上清使用。

（二）維生素

C

的測定

吸取濾液

10 ml

，放入

50 ml

三角瓶中，立即用

0.1% 2

，

6-

二氯酚靛酚鈉溶液滴定至出現明

顯的粉紅色在

15 s

內不消失為止。

記錄所用滴定液體積

（另取

10ml 1%

草酸作空白對照

）

。

（三）標準液的標定

取

1mg/ml

抗壞血酸溶液

1ml

置于錐形瓶中，加

9ml 1%

草酸，用

0.1%2

，

6-

二氯酚靛酚滴定

至淡紅色

15s

不消失。

計算出

1ml

染料相當于多少毫克抗壞血酸

（取

10ml 1%

草酸作空白對

照）

。

1.2ml 

染料相當于

1mg

抗壞血酸

（四）含量計算

維生素

C

（

mg/g

樣品）

=

（樣品消耗染料體積

-

空白消耗染料體積）╳提取定容后的體積╳

1ml

染料能氧化抗壞血酸的毫克數

/

滴定用的樣品體積╳水果質量

六、注意事項

1. 

操作要盡可能快，并防止與鐵、銅器具接觸，以減少維生素

C

的氧化。

2. 

草酸及樣品的提取液避免日光直射

2,6-

二氯酚靛酚鈉法測定維生素

C

含量

一、實驗目的

維生素

C

是生物體內抗氧化體系成員之一。因此，維生素

C

含量可作為植物抗衰老和抗逆

境的重要生理指標，

也可作為果品質量、

選育良種的鑒別指標。

通過本實驗掌握用

2,6-

二氯

酚靛酚鈉法測定植物組織維生素

C

含量的方法。

二、實驗原理

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉是氧化性染料，可將還原態的維生素

C

氧化成脫氫維生素

C

，而染料本

身從深藍色被還原成無色的衍生物。

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉在酸性條件下呈紅色。

在滴定終點之前，

滴下的

2

，

6-

二氯酚靛酚鈉立即

被還原成無色。當溶液從無色轉變成微紅色時，即為滴定終點。

三、實驗材料

新鮮生菜

四、設備與試劑

滴定管、三角瓶、研缽、量筒、移液管

1

％草酸，

0.1%2

，

6-

二氯酚靛酚鈉溶液

五、實驗步驟

（一）維生素

C

的提取

稱取

1.0 g

新鮮樣品（已稱好）

，置研缽中，分次加

20ml 1

％草酸，研成勻漿（用

1%

的草酸

定容

20ml

）

。通過紗布過濾后取

10ml

放于離心機中

3000r/min

離心

10min,

吸取上清使用。

（二）維生素

C

的測定

吸取濾液

10 ml

，放入

50 ml

三角瓶中，立即用

0.1% 2

，

6-

二氯酚靛酚鈉溶液滴定至出現明

顯的粉紅色在

15 s

內不消失為止。

記錄所用滴定液體積

（另取

10ml 1%

草酸作空白對照

）

。

（三）標準液的標定

取

1mg/ml

抗壞血酸溶液

1ml

置于錐形瓶中，加

9ml 1%

草酸，用

0.1%2

，

6-

二氯酚靛酚滴定

至淡紅色

15s

不消失。

計算出

1ml

染料相當于多少毫克抗壞血酸

（取

10ml 1%

草酸作空白對

照）

。

1.2ml 

染料相當于

1mg

抗壞血酸

（四）含量計算

維生素

C

（

mg/g

樣品）

=

（樣品消耗染料體積

-

空白消耗染料體積）╳提取定容后的體積╳

1ml

染料能氧化抗壞血酸的毫克數

/

滴定用的樣品體積╳水果質量

六、注意事項

1. 

操作要盡可能快，并防止與鐵、銅器具接觸，以減少維生素

C

的氧化。

2. 

草酸及樣品的提取液避免日光直射